多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损.成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜.利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期.科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如图.据图回答下列问题:
(1)若已获取PG的mRNA,可通过___方法获取PG基因.PCR技术扩增目的基因的前提是___,以便根据这一序列合成引物.
(2)该质粒含14000碱基对(14kb),若同时使用两种限制酶切割,产生的片段有5kb、7.5kb、1.5kb,则只用限制酶BamHⅠ切割时产生的片段长度分别是___和___.
(3)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有___的培养基进行筛选.如果想通过实验鉴别细胞壁是否再生,可将其置于质量分数为30%的蔗糖溶液中,观察细胞___现象进行判断.
(4)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与___互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达,使番茄果实的保质期延长.
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