多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损.番茄果实成熟中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜.利用基因工程的方法减少PG基因的表达,可延长果实保质期.科学家将抗PG基因接到Ti质粒上,导入到番茄细胞中,得到转基因番茄.请据图1回答:
(1)提取目的基因
①若已获取PG的mRNA,可通过______获取PG基因.
②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录,结构A上应具有______结合位点.得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端.已知BamHI的识别序列如图2-甲所示,请在图2-乙相应位置上,画出目的基因两侧的黏性末端.
(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,培养24~48h后取样,在质量分数为25%的蔗糖溶液中,通过观察细胞是否发生质壁分离现象来鉴别______.
(3)由于导入的目的基因能转录反义RNA,且能与______互补结合,抑制了PG基因的正常表达.若转基因番茄的保质期比非转基因番茄______,则可确定转基因番茄成功.
(4)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因,科研人员常采用______方法使子代保持转基因的优良性状.
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